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雙熒光素酶報告基因檢測【miRNA對靶基因調控研究】
miRNA通過堿基互補配對的方式識別靶基因的3’UTR區，并根據互補程度的不同指導沉默復合體降解靶mRNA或者阻遏靶mRNA的翻譯。因此，可以將目的基因的3’UTR區域構建到含luciferase的報告基因上，通過比較miRNA過表達或inhibitor 與報告基因作用檢測熒光值的變化，判斷miRNA對靶基因的作用。再通過對3’ UTR區進行定點突變的方法進一步確定miRNA與靶基因3’UTR的作用位點。miRNA對靶基因功能的調控是當前研究的熱點。通過利用雙熒光素酶報告基因檢測實驗尋找或驗證miRNA對靶基因的調控作用是當前最常用的技術。
作用示意圖
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