microRNA研究攻略
MicroRNA (miRNA) 是一類(lèi)由內(nèi)源基因編碼的長(zhǎng)度約為22 個(gè)核苷酸的非編碼單鏈RNA分子,它們?cè)趧?dòng)植物中參與轉(zhuǎn)錄后基因表達(dá)調(diào)控。microRNA的表達(dá)、抑制或過(guò)表達(dá)對(duì)于研究基因功能有重要的意義。目前信諾金達(dá)對(duì)于microRNA研究相關(guān)的服務(wù)如下:
1. microRNA qPCR定量檢測(cè)
檢測(cè)microRNA的差異表達(dá),各種無(wú)傳染性致病性樣品均可提供(如果是這里樣品,請(qǐng)?zhí)峁┛俁NA或小RNA)。提供登錄號(hào)(http://www.mirbase.org/ )或microRNA序列。我們出具詳細(xì)實(shí)驗(yàn)報(bào)告,莖環(huán)法或加尾法反轉(zhuǎn)錄均可選擇,服務(wù)的連接如下:
miRNA熒光定量PCR
2. microRNA載體構(gòu)建
3. microRNA靶位點(diǎn)結(jié)合預(yù)測(cè)及雙熒光素酶載體構(gòu)建,熒光素酶檢測(cè)
miRNA通過(guò)堿基互補(bǔ)配對(duì)的方式識(shí)別靶基因的3’UTR區(qū),并根據(jù)互補(bǔ)程度的不同指導(dǎo)沉默復(fù)合體降解靶mRNA或者阻遏靶mRNA的翻譯。根據(jù)軟件或數(shù)據(jù)庫(kù)預(yù)測(cè)靶位點(diǎn)及構(gòu)建靶位點(diǎn)的熒光素酶載體并檢測(cè)。詳細(xì)介紹,請(qǐng)點(diǎn)擊下面鏈接:
雙熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè)【miRNA對(duì)靶基因調(diào)控研究】
4. microRNA轉(zhuǎn)染細(xì)胞后,靶基因的表達(dá)檢測(cè)
參考文獻(xiàn)
1.Kluiver J, Gibcus JH, Hettinga C, Adema A, Richter MKS, et al. (2012) Rapid Generation of MicroRNA Sponges for MicroRNA Inhibition. PLoS ONE 7(1): e29275. doi:10.1371/journal.pone.0029275
2.Tang G, Yan J, Gu Y, Qiao M, Fan R, Mao Y, Tang X. (2012) Construction of short tandem target mimic (STTM) to block the functions of plant and animal microRNAs. Methods 58(2):118-25.
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