miRNA熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)
Real-time miRNA是小的非編碼RNAs,通過(guò)選擇性的與互補(bǔ)的mRNA或3' UTL序列結(jié)合控制著轉(zhuǎn)錄水平的基因表達(dá)。近30%哺乳動(dòng)物基因受小RNA分子的調(diào)控,從而調(diào)節(jié)各種生物功能,包括發(fā)育、細(xì)胞分化、增殖、凋亡、維持stemness和impriting。Northern blot是分析各種miRNAs常用的方法,但Northern blot分析的靈敏度低、通量差仍是其主要不足。實(shí)時(shí)定量PCR由于其靈敏度高、方便快速成為檢測(cè)的一個(gè)不錯(cuò)選擇。
由于成熟的miRNA僅為21-23nt,不能通過(guò)傳統(tǒng)方法進(jìn)行發(fā)轉(zhuǎn)錄,進(jìn)而進(jìn)行定量。信諾金達(dá)采用miRNA加尾方法反轉(zhuǎn)錄miRNA,然后進(jìn)行miRNA定量(見(jiàn)下圖)。
miRNA熒光定量PCR服務(wù)要求
需提供新鮮或者保存完好的細(xì)胞(至少5×10的6次方)、組織(100mg)、血液(300μl)等樣本材料;或純化好的總RNA(OD260/OD280在1.9-2.1之間,完整性好);
同時(shí)提供待測(cè)miRNA序列或登錄號(hào)。
miRNA熒光定量PCR服務(wù)報(bào)告內(nèi)容
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