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熒光定量PCR
miRNA熒光定量PCR
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miRNA熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)
  Real-time miRNA是小的非編碼RNAs,通過(guò)選擇性的與互補(bǔ)的mRNA或3' UTL序列結(jié)合控制著轉(zhuǎn)錄水平的基因表達(dá)。近30%哺乳動(dòng)物基因受小RNA分子的調(diào)控,從而調(diào)節(jié)各種生物功能,包括發(fā)育、細(xì)胞分化、增殖、凋亡、維持stemness和impriting。Northern blot是分析各種miRNAs常用的方法,但Northern blot分析的靈敏度低、通量差仍是其主要不足。實(shí)時(shí)定量PCR由于其靈敏度高、方便快速成為檢測(cè)的一個(gè)不錯(cuò)選擇。 
  由于成熟的miRNA僅為21-23nt,不能通過(guò)傳統(tǒng)方法進(jìn)行發(fā)轉(zhuǎn)錄,進(jìn)而進(jìn)行定量。信諾金達(dá)采用miRNA加尾方法反轉(zhuǎn)錄miRNA,然后進(jìn)行miRNA定量(見(jiàn)下圖)。
miRNA熒光定量PCR服務(wù)要求
  需提供新鮮或者保存完好的細(xì)胞(至少5×10的6次方)、組織(100mg)、血液(300μl)等樣本材料;或純化好的總RNA(OD260/OD280在1.9-2.1之間,完整性好); 同時(shí)提供待測(cè)miRNA序列或登錄號(hào)。
miRNA熒光定量PCR服務(wù)報(bào)告內(nèi)容
  miRNA(或總RNA)濃度,電泳圖片,擴(kuò)增曲線,熔解曲線,Ct值以及數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析(可選),實(shí)驗(yàn)報(bào)告以及剩余引物和模板(信諾金達(dá)可保存1個(gè)月)
服務(wù)編號(hào)
服務(wù)項(xiàng)目
內(nèi)容說(shuō)明
價(jià)格
周期
SGSQP06
miRNA SYBR Green I 相對(duì)定量
樣品檢測(cè)費(fèi)用
檢測(cè)樣品數(shù)<20
詢價(jià)
3-4周※
SGSQP07
檢測(cè)樣品數(shù)≥20
詢價(jià)
SGSNR03
miRNA 提取和逆轉(zhuǎn)錄
新鮮組織、血液、細(xì)胞miRNA提取
詢價(jià)
1-2周

※:一般情況下,3周左右可完成實(shí)驗(yàn)!若遇特殊原因,比如實(shí)驗(yàn)材料降解,需要重新提供樣品或者總RNA需要重新提取;基因表達(dá)量較低,需要構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)品等情況,周期會(huì)有所延長(zhǎng)。

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