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熒光定量PCR簡介

  熒光定量PCR(qPCR)檢測就是在PCR擴增過程中,通過熒光信號,對PCR進程進行實時檢測。由于在PCR擴增的指數時期,模板的Ct值和該模板的起始拷貝數存在線性關系,所以成為定量的依據。由于熒光定量PCR的眾多優點,現在已經是生命科學領域的一項重要技術,并成為基因表達差異和文章發表不可或缺的部分。real-time qPCR輸出的數據不同于常規PCR電泳檢測,很多沒有做過于熒光定量PCR的研究者常常感到高深莫測,不知從何入手;甚至一些做過一些實驗的研究者也會對數據處理分析感到迷惑。很多時候,盡管知曉熒光定量PCR的原理和基本操作,仍然浪費時間和精力,而得不到好的結果或對大量的數據不知所措。 
  信諾金達的熒光定量PCR(qPCR)技術服務,根據實驗目的,設計實驗方案(相對定量或絕對定量;SYBR Green I或Taqman探針方法),用完全按照符合國際標準(MIQE)的熒光定量PCR(qPCR)試劑完成實驗,提供符合文章發表的客觀事實實驗報告和原始數據。
服務要求
  需提供新鮮或保存完好的細胞(至少5×10的6次方)、組織(至少50mg)、血液(300μl)等樣本材料;或純化好的總RNA(OD260/OD280在1.9-2.1之間,完整性好)或總DNA(OD260/OD280在1.7-1.9之間,完整性好);或反轉錄好的cDNA不少于30μl(反轉錄的總RNA完整性好,純度在1.9-2.1之間); 同時提供待測基因序列或登錄號。
報告內容
  總RNA(或DNA)濃度,電泳圖片,擴增曲線,熔解曲線,Ct值以及數據統計分析(可選),實驗報告以及剩余引物和模板(信諾金達可保存1個月)
實驗報告部分組成
熒光定量PCR結果圖
實驗服務內容
服務編號
服務項目
內容說明
價格
周期
SGSQP01
相對定量SYBR Green I染料法
樣品檢測費用
檢測樣品數<10
詢價
1-2周※
SGSQP02
10≤檢測樣品數≤20
SGSQP03
檢測樣品數>20
2-3周※
SGSQP04
相對定量探針法
樣品檢測費用
檢測樣品數<10
詢價
4-5周※
SGSQP05
10≤檢測樣品數≤20
SGSQP06
檢測樣品數>20
SGSQP07
絕對定量探針法
樣品檢測費用
檢測樣品數<10
詢價
4-5周※
SGSQP08
10≤檢測樣品數≤20
SGSQP09
檢測樣品數>20
SGSQP10
絕對定量SYBR GreenI法
樣品檢測費用
檢測樣品數<10
詢價
3-4周※
SGSQP11
10≤檢測樣品數≤20
SGSQP12
檢測樣品數>20
SGSQP13
miRNA SYBR Green I 相對定量
樣品檢測費用
檢測樣品數<20
詢價
3-4周※
SGSQP14
檢測樣品數≥20
SGSQP16
熒光定量PCR標準品構建
目的序列擴增,連接到載體,質?截悢荡_定
詢價
1-2周
熒光定量PCR價格里不包括樣品制備費用,如需cDNA,DNA制備,費用另計。

※:一般情況下,熒光定量PCR(qPCR)實驗3周左右可完成!若遇特殊原因,比如實驗材料降解,需要重新提供樣品或者總RNA需要重新提;基因表達量較低,需要構建標準品等情況,周期會有所延長。

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發表文獻精選:
[1] IF=2.323 Ovarian Circular RNAs Associated with High and Low Fertility in Large White Sows during the Follicular and Luteal Phases of the Estrous Cycle;Animals 2020, 10(4), 696
[2] IF=2.985 A zebrafish (danio rerio) model for high-throughput screening food and drugs with uric acid-lowering activity; Biochemical and Biophysical Research Communications 508 (2019) 494e498
[3] IF=3.191 Genome-Wide DNA Methylation Profile of Gene cis-Acting Element Methylations in All-trans Retinoic Acid-Induced Mouse Cleft Palate; DNA AND CELL BIOLOGY Volume 37, Number 12, 2018
[4] IF=2.274 Analysis of long non-coding RNA expression profiles following focal cerebral ischemia in mice; Neuroscience Letters 665 (2018) 123–129
[5] IF=2.773 Accumulating mechanism of γ-aminobutyric acid in soybean (Glycine max L.) during germination; International Journal of Food Science and Technology 2018, 53, 106–111
相關連接:

miRNA熒光定量PCR

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絕對定量(細菌組成、細菌數量檢測服務)

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如何對熒光定量PCR(qPCR)數據進行統計分析

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