熒光定量PCR簡介
熒光定量PCR(qPCR)檢測就是在PCR擴增過程中,通過熒光信號,對PCR進程進行實時檢測。由于在PCR擴增的指數時期,模板的Ct值和該模板的起始拷貝數存在線性關系,所以成為定量的依據。由于熒光定量PCR的眾多優點,現在已經是生命科學領域的一項重要技術,并成為基因表達差異和文章發表不可或缺的部分。real-time qPCR輸出的數據不同于常規PCR電泳檢測,很多沒有做過于熒光定量PCR的研究者常常感到高深莫測,不知從何入手;甚至一些做過一些實驗的研究者也會對數據處理分析感到迷惑。很多時候,盡管知曉熒光定量PCR的原理和基本操作,仍然浪費時間和精力,而得不到好的結果或對大量的數據不知所措。
信諾金達的熒光定量PCR(qPCR)技術服務,根據實驗目的,設計實驗方案(相對定量或絕對定量;SYBR Green I或Taqman探針方法),用完全按照符合國際標準(MIQE)的熒光定量PCR(qPCR)試劑完成實驗,提供符合文章發表的客觀事實實驗報告和原始數據。
服務要求
需提供新鮮或保存完好的細胞(至少5×10的6次方)、組織(至少50mg)、血液(300μl)等樣本材料;或純化好的總RNA(OD260/OD280在1.9-2.1之間,完整性好)或總DNA(OD260/OD280在1.7-1.9之間,完整性好);或反轉錄好的cDNA不少于30μl(反轉錄的總RNA完整性好,純度在1.9-2.1之間);
同時提供待測基因序列或登錄號。
報告內容
總RNA(或DNA)濃度,電泳圖片,擴增曲線,熔解曲線,Ct值以及 數據統計分析(可選),實驗報告以及剩余引物和模板(信諾金達可保存1個月)
實驗報告部分組成
實驗服務內容
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