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Southern Blot
Southern印跡雜交（Southern blot）是1975年由英國(guó)人southern創(chuàng)建，是研究DNA圖譜的基本技術(shù)。Southern印跡雜交（Southern blot）是進(jìn)行基因組DNA特定序列定位的通用方法。一般利用瓊脂糖凝膠電泳分離經(jīng)限制性?xún)?nèi)切酶消化的DNA片段，將膠上的DNA變性并在原位將單鏈DNA片段轉(zhuǎn)移至尼龍膜或其他固相支持物上，經(jīng)干烤或者紫外線照射固定，再與相對(duì)應(yīng)結(jié)構(gòu)的標(biāo)記探針進(jìn)行雜交，用放射自顯影或酶反應(yīng)顯色，從而檢測(cè)特定DNA分子的含量。信諾金達(dá)提供DIG標(biāo)記的Southern Blot技術(shù)服務(wù)。
服務(wù)要求
1、待雜交目標(biāo)基因序列和含有待雜交基因的陽(yáng)性質(zhì)粒，我們會(huì)依據(jù)Southern blot實(shí)驗(yàn)要求重新選擇全長(zhǎng)或部分區(qū)域作為探針序列，使用PCR法標(biāo)記地高辛探針。
2、待雜交的高質(zhì)量DNA樣品質(zhì)量至關(guān)重要，決定實(shí)驗(yàn)的成敗，請(qǐng)確保DNA抽提質(zhì)量，盡量采用進(jìn)口試劑盒提取或委托信諾金達(dá)提取。
A、基因組DNA檢測(cè)：OD260/OD280=1.8-2.0，濃度大于0.3μg/ul，雜交需模板DNA約60 μg/泳道/次；
B、請(qǐng)?zhí)峁┗蚪MDNA檢測(cè)圖片，要求無(wú)降解，無(wú)蛋白污染；
C、檢測(cè)樣品低溫運(yùn)輸至公司。
3、客戶(hù)如果無(wú)法提供高品質(zhì)的基因組DNA樣品，信諾金達(dá)可以幫助制備可用于Southern Blot檢測(cè)的DNA樣品，客戶(hù)提供樣品要求如下：
A、菌液：不低于500ul，冰袋或者干冰運(yùn)輸
B、組織：總量不小于2g,干冰運(yùn)輸
C、細(xì)胞：提供新鮮的細(xì)胞即可，盡量不要使用鹽溶液沖洗
4、請(qǐng)注明基因組DNA酶切方案，如果項(xiàng)目中需要用到非常規(guī)的限制性?xún)?nèi)切酶，需額外加收酶切費(fèi)用或有客戶(hù)提供相應(yīng)的限制性?xún)?nèi)切酶。
服務(wù)基本流程
1.基因組DNA提取（如果需要）；
2.探針設(shè)計(jì)合成（如果需要）；
3. DIG探針標(biāo)記；
4. Southern雜交檢測(cè)；
5. 提交電子版檢測(cè)報(bào)告，包括詳細(xì)操作程序和實(shí)驗(yàn)結(jié)果等。
Southern Blot服務(wù)交付文件
信諾金達(dá)負(fù)責(zé)對(duì)客戶(hù)提供樣品進(jìn)行DIG探針標(biāo)記與Southern雜交檢測(cè)技術(shù)服務(wù)，最終提供檢測(cè)報(bào)告及檢測(cè)圖片
1、DNA樣品檢測(cè)報(bào)告（實(shí)驗(yàn)樣品不返還，請(qǐng)注意保留備份）
2、標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)流程報(bào)告
3、southern blot實(shí)驗(yàn)結(jié)果檢測(cè)報(bào)告
4、如果是實(shí)驗(yàn)有額外的要求，請(qǐng)?zhí)崆爸码娀蜞]件說(shuō)明
實(shí)驗(yàn)范例圖片：
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