本制品是由miRNA反轉錄及miRNA定量兩部分試劑組成。反轉錄部分的反轉錄酶M-MLV純化自含有莫洛尼氏鼠白血病病毒逆轉錄酶,對該酶進行修飾的新型反轉錄酶,酶活性高,反轉錄效率更快。具有較弱的RNAseH 活性和較高的熱穩定性,可在37℃-60℃之間以miRNA Adaptor Primer為引物合成miRNA的cDNA。
定量部分中的2×SG Green miRNA qPCR Mix是采用SYBR? Green I嵌合熒光法進行miRNA 實時熒光定量PCR的專用預混試劑。制品中含有real-time qRT-PCR反應的最適濃度SYBR? Green I及****的反應緩沖體系包含PCR反應的通用miRNA Rprimer。進行實驗時,在反應體系中加入模板和正向引物(即miRNA本身序列或有部分修飾堿基)即可,配制十分方便簡單。熒光染料SYBR? Green I僅與雙鏈DNA結合后發出熒光,通過檢測反應體系中的SYBR? Green I熒光強度,達到實時檢測PCR產物擴增量的目的,可以對目的miRNA進行準確定量。