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熒光定量PCR(qPCR)絕對定量和相對定量的區(qū)別

  絕對定量的目的是檢測目的基因在樣品中的分子數(shù)目,即通常所說的拷貝數(shù)。相對定量的目的是測定目的基因在兩個(gè)或多個(gè)樣本中的含量的相對比例。而不需要知道它們在每個(gè)樣本中的拷貝數(shù)。
絕對定量
相對定量
概述
檢測目的基因在樣品中的拷貝數(shù),必須使用已知拷貝數(shù)的絕對標(biāo)準(zhǔn)品,必須做標(biāo)準(zhǔn)曲線
測定目的基因在兩個(gè)或多個(gè)樣本中的含量的相對比例,而不需要知道它們在每個(gè)樣本中的拷貝數(shù)。可以做標(biāo)準(zhǔn)曲線,也可以不做標(biāo)準(zhǔn)曲線。
舉例
病毒拷貝數(shù)與疾病狀態(tài)建立關(guān)聯(lián)。
如果研究項(xiàng)目中包括處理過的和未經(jīng)處理的對照樣本,通常可以將未經(jīng)處理的樣本指定為基準(zhǔn),規(guī)定其目的基因濃度為 100%,將經(jīng)處理的樣本的定量結(jié)果除以對照樣品的定量結(jié)果,就可以計(jì)算各個(gè)處理樣本的基因含量相對于未處理樣品的百分比。
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